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实验动物操作技术指导手册-小鼠四种注射方法标准化操作指南

发布日期:2025-03-17 

 

一、操作前准备

  1. 伦理规范

    • 执行机构IACUC批准实验方案(如批准号:XXXX-XX等)

    • 遵循3R原则(替代、减少、优化)

  2. 器材准备

  3. 胰岛素注射器(29-31G)或1ml结核菌素注射器

  4. 75%乙醇棉球、医用胶带、加热垫(静脉注射专用)

  5. 异氟烷麻醉系统(推荐用于静脉注射)

  6. C57BL/6等品系优先,体重18-25g健康小鼠

  7. 静脉注射前禁食4小时(自由饮水)

  8. 动物准备


二、注射技术规范

 

1. 皮下注射(Subcutaneous, SC)

适用场景:疫苗、缓释制剂、单克隆抗体
解剖定位:颈背部肩胛区
操作流程:

  1. 保定人员使小鼠呈"帐篷状"拎起颈背部皮肤

  2. 与体表呈**30-45°**进针,深度5-8mm

  3. 回抽确认无回血后缓慢推注

  4. 拔针后轻压注射点10秒

技术参数:

  • 最大注射体积:2ml(成年鼠)

  • 吸收速率:4-6小时达峰

常见错误:

  • 误入皮内导致局部肿胀(×)

  • 针尖穿透对侧皮肤造成药物流失(×)

 

2. 皮内注射(Intradermal, ID)

适用场景:过敏原测试、结核菌素试验
解剖定位:耳廓背面或尾部近端
操作流程:

  1. 乙醇消毒后绷紧注射部位皮肤

  2. **15°**浅表进针至针尖斜面完全进入真皮层

  3. 缓慢推注形成直径3-5mm皮丘

  4. 退针后可见明显圆形隆起

技术参数:

  • 最大注射体积:50μl

  • 吸收速率:24-48小时局部反应

质控标准:

  • 成功标志:注射后皮肤呈橘皮样外观

  • 失败处理:出现皮下渗漏需重新注射

 

3. 肌肉注射(Intramuscular, IM)

适用场景:抗生素、基因治疗载体
解剖定位:

  • 后肢股四头肌(推荐)

  • 臀部肌群(需避免坐骨神经损伤)

操作流程:

  1. 侧卧位固定,后肢自然伸展

  2. 90°垂直刺入肌肉中段,深度4-6mm

  3. 回抽确认无回血后匀速推注

  4. 拔针后按摩注射部位10秒

技术参数:

  • 最大注射体积:50μl(单侧)

  • 吸收速率:30-60分钟达峰

风险预警:

  • 误伤坐骨神经表现:注射后肢体拖行

  • 肌内血肿处理:立即冰敷并上报

4. 静脉注射(Intravenous, IV)

适用场景:造影剂、化疗药物、单次大剂量给药
解剖定位:尾静脉(侧支静脉优先)
操作流程:

  1. 预热尾静脉(40℃加热垫5分钟)

  2. 尾根部扎止血带使静脉充盈

  3. **10-15°**斜面朝上进针,见回血后松止血带

  4. 以≤100μl/s速度推注

技术参数:

  • 最大注射体积:1ml(需分次注射时间隔15分钟)

  • 吸收速率:即刻入血

关键控制点:

  • 静脉验证:推注时无阻力,皮肤无苍白隆起

  • 外渗处理:立即停止注射,局部注射透明质酸酶

三、术后护理规范

 

  1. 行为学监测

    • 注射后观察30分钟,评估疼痛表现(如梳理行为减少)

    • 肌肉注射部位每日触诊排除脓肿形成

  2. 记录要点

  3. 注射坐标定位图

  4. 异常反应处理记录表

  5. 皮下坏死:局部涂抹磺胺嘧啶银

  6. 静脉栓塞:低分子肝素(20IU/kg)皮下注射

  7. 并发症处理


最后更新:2025-03-17
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