一、操作前准备

伦理与安全

确保实验方案通过机构动物伦理委员会（IACUC）审批

操作人员佩戴无菌手套、口罩及实验服

器材准备

灌胃针：20-22G钝头不锈钢针

1ml注射器（精确到0.01ml刻度）

电子天平（校准至0.1g精度）

加热垫（维持小鼠体温）

成年小鼠（体重≥20g），禁食4小时（自由饮水）

使用异氟烷吸入麻醉（浓度2-3%）或轻柔保定法

动物准备

二、标准化操作流程
步骤1：动物保定
推荐姿势：左手拇指与食指夹住小鼠颈背部皮肤，小指固定尾部，使小鼠呈垂直体位

关键点：确保食管与口腔呈直线，减少插管阻力

步骤2：灌胃针插入
从口角侧方轻柔插入钝头针，沿硬腭向后推进

遇阻力时（约2-3cm深度）轻微旋转针头，刺激吞咽反射

继续推进至贲门标志（总深度≈体长×0.4，成年鼠3-4cm）

步骤3：药物推注
注射速度：≤0.2ml/秒（1ml液体需5秒完成）

推注后保留针头3秒，缓慢退出

步骤4：术后处理
观察30秒，确认无液体反流或呼吸困难

放回笼盒并标记操作时间

三、关键参数与质控标准

四、并发症处理预案
气管误插

症状：呛咳、发绀、呼吸急促

处理：立即拔针，倒置小鼠拍击背部，必要时供氧

食管损伤

症状：口腔出血、摄食量下降

处理：暂停实验，皮下注射止血敏（10mg/kg）

症状：腹部膨隆、活动减少

处理：腹腔穿刺放气（限专业人员操作）

胃扩张

五、操作等级认证标准

六、验证灌胃成功的方法
荧光示踪法：灌胃含荧光素钠（0.1%）溶液，1小时后解剖观察胃内荧光

X射线造影：使用硫酸钡混悬液，实时成像确认药物分布

特别提示：

幼鼠（<15g）需使用24G软头导管

粘稠药液应预热至37℃以降低粘度

每日单鼠灌胃不超过3次，间隔≥4小时

通过规范操作，可确保给药准确性同时最大限度降低动物应激，为科研数据可靠性提供保障。